精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)
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- ·產(chǎn)品名稱:
精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)
- ·產(chǎn)品分類:醫(yī)療器械/診斷監(jiān)護儀及試劑
- ·英文名稱:
- ·批準(zhǔn)文號:
閩明食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2013第1400022號(三明市和眾生物技術(shù)有限公司 生產(chǎn))
- ·主要規(guī)格:20人份/盒、40人份/盒
- ·產(chǎn)品名稱:
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·商品名稱:精子成熟性檢測試劑
·主要成份:10×濃縮洗滌液、固定液、染色液、10×濃縮洗脫液、復(fù)染液、防脫載玻片
·包 裝:盒裝
·用 途:主要用于成年男性精子核蛋白的染色,以此評估成年男性精子成熟比例,可評價男性生育功能。
·用 法:標(biāo)本的處理檢測
·科室類別:實驗/化驗/病理科  計生科
·批準(zhǔn)日期:2013.11.20
·有 效 期:2017.11.19
·產(chǎn)品說明:
【品 名】
精子權(quán)威五聯(lián)檢:精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)
【試劑特點】無須特殊儀器,簡單、快速、準(zhǔn)確。
【檢驗原理】
成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白,富含精氨酸和胱氨酸殘基;不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白,富含賴氨酸殘基。酸性條件下,苯胺藍與賴氨酸殘基結(jié)合生成紫藍色化合物,從而指示不成熟核蛋白的存在,而核蛋白成熟的精子則染成紅色。
【樣本要求】液化后的新鮮精液標(biāo)本
【操作方法】
1.試劑的準(zhǔn)備
1)洗滌工作液的配制:A液(10×濃縮洗滌液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
2)洗脫工作液的配制:D液(10×濃縮洗脫液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
2.樣本準(zhǔn)備
1)新鮮精液標(biāo)本置于37℃恒溫水浴箱中完全液化。
2)精子的洗滌及稀釋,方法如下:①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml,以一次性吸管反復(fù)吹打精子數(shù)次后,2000轉(zhuǎn)離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團;②在Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml,以一次性吸管反復(fù)吹打精子數(shù)次后,2000轉(zhuǎn)離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團;③再次重復(fù)②的操作,離心結(jié)束后,棄去上清液。④在Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml,混合精子懸液。
3.檢測步驟
1)取上述已制備好的精子懸液15μl,均勻涂布于防脫載玻片上,自然干燥。
2)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi),滴加B液(固定液)2—3滴,室溫反應(yīng)2min。
3)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
4)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi),滴加C液(染色液)2—4滴,室溫反應(yīng)5min。
5)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
6)將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應(yīng)池中,使待測標(biāo)本涂片區(qū)完全浸沒于洗脫工作液中,室溫反應(yīng)5min。
7)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
8)在涂片區(qū)內(nèi)滴加E液(復(fù)染液)2—4滴,室溫反應(yīng)5min。
9)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),迅速吹干玻片。(如果需要長久保存該涂片樣本,可選擇完成以下脫水步驟:分別將組織片依次置于70%、90%和100%乙醇中各2min,晾干。)
10)鏡檢。
【染色結(jié)果】
核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍色或紫色,核蛋白成熟的精子染色呈紅色。
【參考值】DFI(單鏈DNA精子)<10%為正常;當(dāng)DFI>25%時,受精率<20%。
【注意事項】
1.受試者應(yīng)按照WHO技術(shù)規(guī)范采集精液標(biāo)本。
2.若精液標(biāo)本粘稠度高或液化不完全,可導(dǎo)致檢測結(jié)果非特異性假陽性。需要預(yù)先降低精液粘度或促進精液完全液化后,才能用于檢測。
3.精子密度過高可能導(dǎo)致脫色不均勻,從而對檢測結(jié)果產(chǎn)生不良影響;精子密度過低則不會影響檢測結(jié)果;涂片時應(yīng)避免涂布過于稠密。
4.精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結(jié)果。
5.染紫藍色精子為核蛋白不成熟精子,染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期,因此此類精子頭部呈淡藍色或紫色;精子頭部局部染淡藍色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍色,均是精子不夠成熟的表現(xiàn)。
6.鏡下觀察結(jié)果時,不要在精子堆集分布的區(qū)域計數(shù),應(yīng)選擇精子散在分布的區(qū)域進行計數(shù)。
7.受檢者所有樣品均應(yīng)視為潛在的傳染源,檢測完畢的樣本、試劑均須作為醫(yī)療廢物處理,避免污染環(huán)境。
8.精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑,檢測結(jié)果僅供臨床參考,對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況結(jié)合考慮。
【基本信息】
存儲條件及有效期:試劑盒于2-8℃避光保存,有效期12個月。
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- 聯(lián)系方式
- 生產(chǎn)企業(yè):
三明市和眾生物技術(shù)有限公司
- 聯(lián) 系 人:陳先生
- 聯(lián)系電話:0598-8297899
- 聯(lián)系我時,請說是在中國醫(yī)療器械網(wǎng)上看到的,謝謝!
- 手 機:
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